Sistema de expresión recombinante de la proteína de fase aguda “Pig-MAP” para su uso como biomarcador de estrés
Resumen
Resumen. Los cerdos dentro de producciones tecnificadas hacen frente a condiciones que pueden generar estrés, relacionado con la disminución de bienestar animal. El uso de biomarcadores; moléculas que sintetizan y liberan los animales en condiciones específicas, nos pueden ayudar en la medición de parámetros para la evaluación del bienestar animal. Las proteínas de fase aguda son proteínas plasmáticas secretadas en el hígado como respuesta de fase aguda, debido a infecciones, inflamación, daño tisular o estrés. PigMAP es una glicoproteína de fase aguda, secretada por los cerdos. Por ello se seleccionó y clonó la porción N-terminal correspondiente a esta proteína en el vector pJET1.2/blunt y se usó para amplificar y subclonar al vector de expresión pETSUMO (pETSUMO-Nterminal), finalmente, el plásmido recombinante se corroboró mediante PCR y prueba de secuenciación. Por lo tanto, se obtuvo por primera vez un sistema de expresión para la proteína recombinante PigMAP con potencial para desarrollar un sistema de evaluación del bienestar animal en cerdos.
Abstract. Pigs in technical productions face conditions that can generate stress, which is related to a decrease in animal welfare. The use of biomarkers, molecules that are synthesized and released by animals under specific conditions, can help in the measurement of parameters for the evaluation of animal welfare. Acute phase proteins are plasma proteins secreted in the liver as an acute phase response to infections, inflammation, tissue damage, or stress. PigMAP is an acute-phase glycoprotein that is secreted by pigs. Therefore, the N-terminal portion corresponding to this protein was selected and cloned into the pJET1.2/blunt vector and used to amplify and subclone the pETSUMO expression vector (pETSUMO-N-terminal). The recombinant plasmid was confirmed by PCR. and sequencing tests. Therefore, an expression system for the PigMAP recombinant protein was obtained for the first time, with the potential to develop an animal welfare assessment system for pigs.
